Quels sont les protocoles recommandés pour l'utilisation de Zymolyase dans la production de sphéroplastes de levure?
Chez MP Biomedicals, nous sommes fiers de fournir des produits de haute qualité tels que le Zymolyase, essentiel pour la lyse de levure et la production de sphéroplastes. L'utilisation de Zymolyase pour la production de sphéroplastes comprend plusieurs étapes critiques. Avant tout, il est essentiel de préparer une suspension cellulaire fraîche de la levure dans un tampon approprié tel que le tampon 1M sorbitol. La concentration de Zymolyase doit être optimisée pour la souche de levure utilisée, mais en général, un dosage de 1-10 mg par gramme de cellules humides est recommandé.
La réaction doit être incubée à 30°C tout en agitant doucement pour assurer une digestion homogène de la paroi cellulaire, et le processus doit être étroitement surveillé au microscope afin d'éviter la lyse complète des cellules. Après le traitement, les sphéroplastes peuvent être collectés par centrifugation douce et réutilisés pour diverses applications, telles que l'étude de la fonction cellulaire ou la transformation génétique. Il est également recommandé de consulter la fiche technique de Zymolyase pour des instructions détaillées et d'adapter le protocole aux besoins spécifiques de votre laboratoire.
